線(xiàn)粒體染色試劑盒可做的事情還蠻多的
更新時(shí)間：2018-07-10 點(diǎn)擊次數：1148
線(xiàn)粒體染色試劑盒可以標記活細胞中的線(xiàn)粒體，使之帶紅色熒光(Ex/Em =575/600nm)(Texas Red filter) 本試劑盒使用染料為一種疏水性復合物，屬線(xiàn)粒體選擇性染料，該染料能輕易進(jìn)入活細胞內，通過(guò)線(xiàn)粒體膜電位變化滲透進(jìn)入線(xiàn)粒體，并在線(xiàn)粒體中富集。Smart Cell線(xiàn)粒體染色試劑盒提供了標記線(xiàn)粒體的全套試劑，能提供藍色/綠色/紅色/橙色等不同熒光供選擇，既可單獨使用，也支持對細胞的多重熒光分析。這種的細胞標簽為從空間上和時(shí)間上研究發(fā)生的細胞活動(dòng)提供了一種十分有效的方法。
線(xiàn)粒體染色試劑盒檢測原理，L-谷氨酰胺是人體蛋白質(zhì)所必需的20種氨基酸之一。是人體內zui普遍的、不可缺乏的條件性必需氨基酸，是構成蛋白質(zhì)*的氨基酸之一，更是某些細胞培養中zui基本的元素。由于谷氨酰胺不穩定的特性，在細胞培養基的整合中，易自發(fā)性分解為谷氨酸和氨離子，而氨離子對細胞的毒性很強，因此，在細胞培養體系中，須密切關(guān)注谷氨酰胺的儲存壽命（SHELF LIFE）和實(shí)時(shí)監測。在谷氨酰胺酶和谷氨酸脫氫酶的雙酶循環(huán)反應系統中，L-谷氨酰胺首先發(fā)生脫氨基反應，產(chǎn)生谷氨酸和氨離子。
線(xiàn)粒體染色試劑盒細胞染色，貼壁細胞，在96孔板（100μL）或培養皿內培養細胞，當細胞達到70-80%融合度，在96孔板或培養皿內添加等體積的染色工作液(步驟1.2)，在37°C, 5% CO2條件下培養細胞30分鐘-2小時(shí)。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長(cháng)培養基按1:1)替換色染液。同TRITC設置在顯微鏡下進(jìn)行熒光觀(guān)察。注意：如果細胞沒(méi)有充分染色，可以適當增加染料濃度或增加染色時(shí)間進(jìn)行改善。懸浮細胞: 在1000 rpm 條件下離心細胞培養液5分鐘，棄去上清，用預熱好的細胞培養液溫和的重懸細胞，然后添加等體積的染色工作液(步驟1.2)在37°C, 5% CO2條件下培養細胞30分鐘-2小時(shí)。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長(cháng)培養基按1:1)替換色染液。同TexasRed設置在顯微鏡下進(jìn)行熒光觀(guān)察。
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