PEI轉染試劑是非常有潛力的非病毒質(zhì)粒載體試劑
更新時(shí)間：2022-03-28 點(diǎn)擊次數：1573
分子生物學(xué)的發(fā)展使得大量致病基因被鑒定，科學(xué)家在這些研究成果的基礎上發(fā)展了基因治療?；蛑委熓抢没蜉d體將治療基因導入患者體內，進(jìn)而表達功能蛋白以達到治療的目的?；蛑委焸鬟fDNA面臨的挑戰之一是外源治療基因會(huì )被體液和胞外空間的核酸內切酶降解。治療基因在目標組織中的選擇性積累、細胞內化以及從溶酶體逃逸這些問(wèn)題對所有核酸治療劑都是需要克服的。DNA必須輸送至細胞核以允許獲得轉錄和表達。因此，設計和制備安全高效的基因載體來(lái)壓縮并且保護治療基因以免被核酸內切酶降解并延長(cháng)其在體內的循環(huán)時(shí)間顯得尤為重要。目前，基因載體主要分為兩大類(lèi)：病毒載體和非病毒載體。
最初受到重視的基因載體是病毒，因為其具有較高的轉染效率。理論上，病毒載體轉染效率為100％。
陽(yáng)離子聚合物-聚乙烯亞胺（PEI）是目前報道的工業(yè)化、大規模瞬時(shí)轉染表達重組蛋白領(lǐng)域*泛使用的基因載體和轉染試劑。人胚胎腎細胞（HEK293）和中國倉鼠卵巢細胞（CHO）細胞是目前工業(yè)大規模瞬時(shí)轉染領(lǐng)域使用廣泛的宿主細胞。PEI是基因載體中最常見(jiàn)的陽(yáng)離子聚合物之一，因為其具有高的轉染效率，所以作為基因轉染的黃金標準而常被用來(lái)參照。PEI形成復合物的最佳分子量通常在5～25kDa之間。高分子量PEI一般比低分子量PEI有更高轉染效率，但問(wèn)題在于，高分子量的PEI往往有較高的細胞毒性，這一規律與其他聚陽(yáng)離子類(lèi)似。
目前使用廣泛的陽(yáng)離子聚合物轉染試劑是PEI。PEI制備簡(jiǎn)單，價(jià)格便宜，有線(xiàn)狀和枝狀兩種商業(yè)試劑可選，是瞬時(shí)轉染放大轉染試劑的較好選擇，是非常有潛力的非病毒質(zhì)粒載體試劑。
由于PEI帶正電荷，與帶負電荷的DNA結合形成帶正電荷的PEI-DNA復合物，可以與帶負電荷的細胞表面結合。PEI-DNA復合物通過(guò)胞吞作用進(jìn)入細胞內部形成內涵體，之后一部分從內涵體中逃逸進(jìn)入細胞核內，未逃逸的進(jìn)入溶酶體被降解，無(wú)法入核的DNA會(huì )在100min內被胞漿中的DNA酶降解。
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