選擇真核細胞轉染試劑要考慮哪些因素
更新時(shí)間:2022-08-30 點(diǎn)擊次數:626
轉染是采用除病毒感染外的其他方法將核酸(DNA或RNA)人工導入細胞的過(guò)程。采用各種化學(xué)、生物學(xué)或物理方法導入外源性核酸會(huì )改變細胞的特性,從而實(shí)現細胞基因功能和蛋白質(zhì)表達研究。轉染后,導入的核酸可以瞬時(shí)性地存在于細胞內,只表達一段時(shí)間且不會(huì )復制,也可以穩定地整合至受體基因組內,隨著(zhù)宿主基因組的復制而復制,各種基因輸送系統采用的術(shù)語(yǔ)與該領(lǐng)域的技術(shù)進(jìn)展步調一致,并進(jìn)一步區分不同的方法和細胞類(lèi)型。
轉染技術(shù)作為一種分析工具,可將外源基因導入真核細胞,有助于機體表征遺傳、蛋白質(zhì)合成、細胞生長(cháng)和發(fā)育等功能的研究。慢病毒載體,腺病毒載體和逆轉錄病毒載體等病毒傳遞系統可用于轉運DNA或RNA到目的細胞中。病毒介導的轉染技術(shù)整合效率高,但存在一定的生物安全隱患,且轉染的準備程序比較復雜,對細胞類(lèi)型有很強的選擇性。此外,在進(jìn)行病毒轉染之前,需要考慮幾種限制因素,如病毒載體的裂解性質(zhì),細胞系包裝和宿主細胞特異性等。
理想的核酸轉染試劑應該是高效、安全、簡(jiǎn)單、省時(shí)和經(jīng)濟的。隨著(zhù)轉染方法的不斷發(fā)展以及轉染實(shí)驗日益增加,選擇適合的轉染試劑以達到轉染效率顯得尤為重要。在考慮合適的
真核細胞轉染試劑時(shí),應首先確定測定的細胞類(lèi)型和培養條件。罕見(jiàn)的細胞培養,如神經(jīng)元和原代細胞等通常難以轉染,因此可能需要能促進(jìn)轉染的試劑。此外,在選擇合適的轉染試劑之前,還應該考慮試劑水平和細胞毒性參數。