轉染試劑用于提高基因實(shí)驗的效率
更新時(shí)間:2022-11-30 點(diǎn)擊次數:831
轉染是一種將外來(lái)顆粒和核酸轉移到細胞中的技術(shù),它可以通過(guò)化學(xué)的方式來(lái)實(shí)現。轉染試劑用于提高基因實(shí)驗的效率,從而可以在應用基因和基因組令人難以置信的功能領(lǐng)域進(jìn)行大量研究。在所有轉染實(shí)驗中,轉染方式的選擇尤為重要。
陽(yáng)離子聚合物與帶負電荷的核酸序列結合,帶正電荷的復合物被細胞膜吸引并通過(guò)內吞作用整合到宿主細胞中。此類(lèi)試劑包括PLGA(聚乳酸-乙醇酸共聚物),一種可安全用于轉染程序的食品級聚合物,以及PBAE(聚-β-氨基酯),一種能夠保護DNA分子的聚合物在宿主細胞內遞送。這些從PLGA(聚乳酸-乙醇酸共聚物)和PBAE(聚-β-氨基酯)獲得的聚合物可用于將DNA構建體安全有效地輸送到培養細胞中。許多基于聚乙烯亞胺的聚合物,并用于多種哺乳動(dòng)物細胞系以及昆蟲(chóng)和細菌細胞中進(jìn)行瞬時(shí)和穩定的轉染?;诰垡蚁﹣啺返木酆衔锟捎糜谂囵B神經(jīng)元細胞。成熟的神經(jīng)元由于不經(jīng)歷細胞分裂,所以神經(jīng)元細胞培養物較難培養。雖然細胞分裂的缺乏可以通過(guò)腫瘤性、永生化的神經(jīng)細胞來(lái)克服,但由于癌性神經(jīng)元和普通神經(jīng)元細胞之間存在著(zhù)重大差異。所以只能通過(guò)基于聚乙烯亞胺的聚合物涂層來(lái)抑制神經(jīng)元細胞退化。
納米顆粒是由無(wú)機和有機顆粒和聚合物組成的非病毒載體,可用于基因傳遞,避免使用天然生物聚合物(如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和糖)時(shí)的毒性和相容性問(wèn)題。這些載體確?;蜻f送到特定細胞或特定組織中,用于基因治療。
聚乙烯亞胺和三聚磷酸鹽組成的納米顆粒多數是通過(guò)冷凍干燥法??茖W(xué)家們使用納米粒子將siRNA和質(zhì)粒轉染到癌細胞系和原代細胞培養物中。大多數DNA轉染試劑與對血清敏感的siRNA不相容,因此納米顆粒在RNAi轉染中起著(zhù)至關(guān)重要的作用。