簡(jiǎn)要描述:GelGreen 核酸染料(10,000 × in water)是一種結合于所有dsDNA雙螺旋小溝區域的具有*設計的熒光染料。在游離狀態(tài)下,GelGreen發(fā)出微弱的熒光,但一旦與雙鏈DNA結合后,熒光大大增強。因此,GelGreen的熒光信號強度與雙鏈DNA的數量相關(guān)。GelGreen與 EB 有相同的光譜特性,無(wú)需改變?yōu)V光片及觀(guān)察裝置。
產(chǎn)品分類(lèi)
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品牌 | 其他品牌 | 貨號 | AN34L033 |
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規格 | 500μl | 供貨周期 | 現貨 |
應用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
GelGreen初由美國B(niǎo)iotium公司研發(fā),是一種結合于所有dsDNA雙螺旋小溝區域的具有*設計的熒光染料,熒光信號強度與雙鏈DNA的數量相關(guān),與溴化乙錠(EB)有相同的光譜特性,使用觀(guān)察EB的普通紫外凝膠透射儀觀(guān)察即可,染色后的DNA條帶在藍光透射下呈現綠色熒光。這種新型染料具有不能穿透細胞膜、與雙鏈DNA的結合力非常強,基因誘變性低,熱穩定性高,對分子生物學(xué)中常用的酶沒(méi)有抑制作用及適用范圍廣等優(yōu)點(diǎn),得到了市場(chǎng)的廣泛認可。該產(chǎn)品適用于瓊脂糖和聚acrylamide凝膠電泳中的dsDNA、ssDNA及RNA染色。
訂購信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號 | 規格 | 價(jià)格 |
GelGreen 核酸染料(10,000 × in water) | AN34L033 | 500 μL | 350 |
運輸與保存
常溫運輸。常溫保存,有效期99個(gè)月。
使用方法
膠染法(使用方法同EB,電泳前膠染色)
(1)制膠時(shí)按1:10000比例加入GelGreen核酸染料(例如:每50 mL瓊脂糖溶液中加入5 μL GelGreen 10,000×儲液)。由于GelGreen具有良好的熱穩定性,可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷卻。搖晃,振蕩或者翻轉以保證染料充分混勻。此方法不適合預制聚丙烯 xian 胺凝膠。
(2)按照常規方法進(jìn)行電泳。
2.泡染法(電泳后膠染色)
(1)按照常規方法進(jìn)行電泳后,將凝膠小心地放入合適的容器中,緩慢加入足量的3×染色液(用0.1 M NaCl 溶液稀釋GelGreen染液3300倍形成3×染色液,如將15 μL GelGreen 10,000×儲液加入到50 mL 0.1 M NaCl 溶液,該染色液可重復使用3次,4℃(室溫)避光保存1周)浸沒(méi)凝膠。
(2)室溫振蕩染色30 min左右,輕輕搖晃,最佳染色時(shí)間根據凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含3.5~10%丙烯 xian 胺的凝膠,染色時(shí)間通常介于30 min到1 h,并隨丙烯 xian 胺含量增加而延長(cháng)。
注意事項
本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
在常規用酒精沉淀核酸的過(guò)程中,GelGreen 可以全部從雙鏈核酸上去掉。
如果想對用 GelGreen 染過(guò)的膠進(jìn)行 Southern blots,建議在預雜化和雜化溶液中加入 0.1%~ 0.3% 的SDS。
為了避免染料對核酸遷移的影響,推薦使用泡染法進(jìn)行染色。
GelGreen對玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過(guò)程中用聚丙烯類(lèi)容器。
GelGreen原液在室溫保存,如放置冰箱保存會(huì )產(chǎn)生部分沉淀,使用前適當加熱并搖勻即可正常使用。
如果總是看到條帶彌散或分離不理想,建議使用泡染法染色以確認問(wèn)題是否與染料有關(guān)。如果染色后問(wèn)題依舊存在,則說(shuō)明問(wèn)題與染料無(wú)關(guān),請嘗試:降低瓊脂糖濃度、延長(cháng)凝膠時(shí)間以保證邊緣清晰、改進(jìn)上樣技巧或選擇泡染法染色。
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