簡(jiǎn)要描述:EZ Trans RNA轉染試劑(下文簡(jiǎn)稱(chēng)EZ Trans)采用新型脂質(zhì)體納米材料,可用來(lái)轉染siRNA、miRNA等150bp以?xún)鹊男》肿覴NA和DNA,轉染細胞包括絕大多數貼壁生長(cháng)的細胞,如一般細胞株、腫瘤細胞株等。
產(chǎn)品分類(lèi)
Product Category詳細介紹
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | AC04L051 |
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供貨周期 | 現貨 | 應用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合 |
產(chǎn)品描述
EZ Trans RNA轉染試劑(下文簡(jiǎn)稱(chēng)EZ Trans)采用新型脂質(zhì)體納米材料,可用來(lái)轉染siRNA、miRNA等150bp以?xún)鹊男》肿覴NA和DNA,轉染細胞包括絕大多數貼壁生長(cháng)的細胞,如一般細胞株、腫瘤細胞株等。
本轉染試劑是一類(lèi)快捷高效即用型試劑溶液,僅需在EP管中將細胞培液與siRNA或miRNA等轉染目的小 RNA同轉染試劑混合,室溫孵育約 2 min后加入*細胞培養液中即可,血清對轉染效果沒(méi)有影響,實(shí)驗過(guò)程無(wú)需刻意添加或更換培養液。
訂購信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號 | 規格 | 價(jià)格 |
EZ Trans RNA 轉染試劑 | AC04L051 | 1 mL | 1600 |
運輸與保存
藍冰運輸。4℃保存,有效期 12 個(gè)月。 【注】: 不可冷凍!
使用方法(以 24 孔板為例,其他培養皿中轉染請參考表 1)
1. 接種細胞
對于貼壁細胞,轉染前 18-24 h 進(jìn)行鋪板,本轉染試劑要求細胞鋪板密度不高,建議 70%-90% 為佳。【注】:培養液中的血清不影響轉染效率。轉染試劑使用量受細胞類(lèi)型及其他實(shí)驗條件影響,建議初次使用 時(shí)設置梯度進(jìn)行優(yōu)化最佳使用量。
2. 準備EZ Trans-轉染目的小RNA(siRNA或miRNA等)復合物
(1)對于每孔細胞, 將 20 pmol待轉染目的小RNA(siRNA或miRNA等)稀釋到 50 μL 基礎培養基或*培養基中(無(wú)需額外的Opti-MEM培養基),混勻。
(2)對于每孔細胞,將 1.25-2.5 μL(視細胞類(lèi)型調整)EZ Trans 轉染試劑添加到上述步驟(1)中的混合培液中,輕輕混勻。
(3)室溫孵育約 2 min。
3. 轉染細胞
(1)將上述孵育完成的轉染復合物均勻滴入到含細胞的培養皿中。輕輕晃動(dòng)培養皿或輕微振蕩,讓轉染復合物分散均勻。
(2)在 37℃,5% CO2 培養箱培養 24-48 h,無(wú)需更換新的培養液,之后即可對轉入基因表達分析。
注意事項
1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
2. 小RNA(siRNA或miRNA等)質(zhì)量:請務(wù)必使用高純度無(wú)內毒素轉染級RNA。
3. 細胞條件:使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保細胞沒(méi)有被細菌、真菌或支原體污染。如果細胞 是近期復蘇的液氮凍存細胞,請在轉染前至少傳代兩次。
4. 細胞培養液要求:EZ Trans 細胞轉染試劑可用于有血清培養基的轉染,并且轉染前后不需要換培養基。確保細胞培養液沒(méi)有被細菌、真菌或支原體污染。
5. 試劑用量的優(yōu)化:RNA 濃度和轉染試劑使用量受細胞類(lèi)型及其他實(shí)驗條件影響,初次使用應優(yōu)化 RNA 濃 度和轉染試劑量以得到最大的轉染效率。使用者可嘗試每 20 pmol RNA 使用 1~4 μL 體積EZ Trans細胞轉染試劑進(jìn)行優(yōu)化。
表 1:不同培養體積對應的待轉 RNA、 EZ Trans、稀釋液用量
培養器皿 | 培養液體積(mL) | RNA 量(pmol) | EZ Trans(μL) | 稀釋液(μL) |
48 孔板 | 0.3 | 10 | 0.625-1.25 | 25 |
24 孔板 | 0.5 | 20 | 1.25-2.5 | 50 |
12 孔板 | 1 | 40 | 2.5-5 | 100 |
6 孔板 | 2 | 80 | 5-10 | 200 |
35 mm 培養皿 | 3.5 | 140 | 8.75-17.5 | 250 |
60 mm 培養皿 | 6 | 240 | 15-30 | 300 |
100 mm 培養皿 | 10 | 400 | 25-50 | 400 |
【注】:該表使用量?jì)H供參考,具體使用量還需根據細胞類(lèi)型及其他實(shí)驗條件進(jìn)行優(yōu)化。
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