簡(jiǎn)要描述:外泌體示蹤試劑盒包含創(chuàng)新性的 Exosome Tracker,一種專用于外泌體熒光標(biāo)記的示蹤染料探針。Exosome Tracker 的標(biāo)記效率高于其他探針,采用共價(jià)方式嵌入胞外囊泡的雙層膜結(jié)構(gòu),優(yōu)于親脂或疏水性染料,避免自組裝納米粒子引起的信號(hào)干擾,從而提升標(biāo)記效率。
產(chǎn)品分類
Product Category詳細(xì)介紹
品牌 | Life-iLab/李記生物 | 貨號(hào) | AC25L166 |
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規(guī)格 | 100T | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品描述
本試劑盒包含創(chuàng)新性的 Exosome Tracker,一種專用于外泌體熒光標(biāo)記的示蹤染料探針。Exosome Tracker 的標(biāo)記效率高于其他探針,采用共價(jià)方式嵌入胞外囊泡的雙層膜結(jié)構(gòu),優(yōu)于親脂或疏水性染料,避免自組裝納米粒子引起的信號(hào)干擾,從而提升標(biāo)記效率。Exosome Tracker可簡(jiǎn)單有效的進(jìn)行體外外泌體的跟蹤和監(jiān)測(cè),因其具有較長(zhǎng)的體內(nèi)半衰期,標(biāo)記后的外泌體可用于動(dòng)物體內(nèi)示蹤實(shí)驗(yàn)。其激發(fā)光波長(zhǎng)為 580 nm,發(fā)射光波長(zhǎng)為 664 nm。
訂購(gòu)信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
外泌體示蹤試劑盒 | AC25L166 | 100T |
產(chǎn)品組分
組分 | 規(guī)格 |
A. Exosome Tracker | 100μL |
B. Exosome Tracker Remover | 1mL |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃避光保存,有效期12個(gè)月。
使用方法
自備試劑與耗材:DAPI、PBS(新鮮配制,無(wú)菌)、共聚焦專用平皿、緩沖液置換試劑盒或其他緩沖液置換產(chǎn)品。
1. 試劑準(zhǔn)備
Exosome Tracker 使用前需從 -20℃ 取出,避光解凍備用。注:Exosome Tracker 為 200×濃度,收到后建議分裝避光保存于 -20℃。
2. 標(biāo)記
(1) 標(biāo)記外泌體:按 1:200 (v/v) 比例將 Exosome Tracker添加到外泌體溶液中,37℃避光孵育1 h,輕輕上下顛倒以確保染色均勻。
(2) 去除游離Exosome Tracker:加入 0.1倍體積的 Exosome Tracker Remover,室溫避光孵育10 min以中和多余探針,再用緩沖液置換試劑盒將溶液置換為 PBS,以去除游離的 Exosome Tracker,獲得純凈的熒光標(biāo)記外泌體。注:根據(jù)樣本體積選擇合適的緩沖液置換產(chǎn)品:S-緩沖液置換試劑盒 (貨號(hào): AC25L491) 適用于100-180 μL;M-緩沖液置換試劑盒 (貨號(hào): AC25L492) 適用于 0.2-0.5 mL;L-緩沖液置換試劑盒 (貨號(hào): AC25L493) 適用于1-2.5 mL。
3. 示蹤
對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
(1) 接種細(xì)胞:按合適的密度將細(xì)胞接種在共聚焦專用平皿中培養(yǎng)。
(2) 孵育外泌體:當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至70%時(shí),加入熒光標(biāo)記的外泌體,在細(xì)胞培養(yǎng)條件下避光孵育。注:根據(jù)細(xì)胞類型和外泌體來(lái)源確定具體孵育時(shí)間,通常為2h,可調(diào)整范圍為2-4h。
(3) 清洗與染色:取出平皿,用 PBS 清洗3次,加入DAPI溶液,室溫避光孵育10min,再用PBS清洗3次。若直接檢測(cè)可跳過(guò)固定步驟,否則用4%多聚甲醛固定細(xì)胞。
(4) 熒光檢測(cè):在激光共聚焦顯微鏡下觀察細(xì)胞和外泌體,拍照記錄。
對(duì)于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
(1) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物準(zhǔn)備:例如選擇 6-8 周齡小鼠或其他適齡動(dòng)物模型,每周給予兩次一定劑量的外泌體。
(2) 外泌體給藥:根據(jù)預(yù)設(shè)的外泌體劑量、給藥方式和頻次,將 Exosome Tracker 標(biāo)記的外泌體注入動(dòng)物體內(nèi)。
(3) 檢測(cè):外泌體給藥后,通常在 6-8 周后進(jìn)行活體發(fā)光成像或其他熒光檢測(cè)。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
3. 熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,操作過(guò)程中請(qǐng)注意避光,以減緩熒光淬滅
4. 本品需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)條件以及應(yīng)用方向來(lái)摸索最佳的工作濃度及染色時(shí)間。
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