Q:C4058L1080和C4058L1090有什么區別?
A:我們有兩種,80是針對線(xiàn)性的,90是支鏈轉染,比如慢性病包試劑用90比較好。
Q:李記細胞轉染液和PEI固體自行配制溶液相比的優(yōu)勢在哪里?
A:很多客戶(hù)買(mǎi)固體很難把握的,固體非常不容易溶解,包裝比較大,用的不多建議您選液體的,已做無(wú)菌處理,可以直接使用。
Q:接種細胞,必須用膠原酶消化?胰酶不能用么?
A:膠原酶從細菌中提取出來(lái)的酶,對膠原有很強的消化作用,適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織,它對細胞間質(zhì)有較好的消化作用,對細胞本身影響不大,可使細胞與膠原成分脫離但不受傷害。膠原酶消化的不是細胞表面,而是細胞間質(zhì)。
胰酶消化作用于與賴(lài)氨酸或精氨酸相連接的肽腱,除去細胞間粘蛋白及糖蛋白,影響細胞骨架,從而使細胞分離。對細胞有輕微影響,進(jìn)而影響后續轉染效率及細胞活性,在一定程度上體現為轉染試劑的毒性。
Q:使用方法提到,轉染細胞時(shí)將復合物(40ul質(zhì)粒稀釋液+40ul 轉染試劑稀釋液)滴入到含細胞的培養皿中。此時(shí)含細胞的培養皿里面有含血清的培養基么?如果有,體積是多少?以24孔板為例,是0.5ml么?
A:培養皿中培養基成分為正常培養細胞的成分,原來(lái)培養時(shí)有血清,那就有。培養孔中培養液的體積也是正常情況,你說(shuō)的對,如果是24孔板,那么體積應該是0.5ml
Q:轉染細胞步驟中提到,去除含復合物的培養液之后呢?要加含血清的培養基么?加多少,以24孔板為例?加完培養基后繼續培養?培養多久?
A:去除含復合物的培養基,過(guò)程是逐步的,有兩個(gè)目的,一是盡可能提高轉染效率,二是盡可能降低細胞毒性。減少EZ Trans-DNA復合物的過(guò)程,也是恢復到細胞正常培養基成分的過(guò)程。后續培養多久,說(shuō)明書(shū)為建議時(shí)間,你可以通過(guò)實(shí)驗摸索,要根據你的轉染效率,基因表達情況確定。
Q:轉染細胞步驟中提到,這里的7h,指的是去除含復合物的培養液換成含血清的培養基之后的7h,還是指加入復合物后轉染7h?- 同樣的,“24-48小時(shí)內檢測轉染效率”指的是去除含復合物的培養液換成含血清的培養基之后的24-48h,還是指加入復合物后轉染24-48h?
A:所有時(shí)間都是從EZ Trans-DNA復合物與細胞接觸開(kāi)始算.
電話(huà)
微信咨詢(xún)
關(guān)注公眾號