預染蛋白Marker和未預染蛋白Marker有哪些不一樣
更新時(shí)間:2021-07-27 點(diǎn)擊次數:1302
在Western實(shí)驗中,蛋白Marker可以監控蛋白質(zhì)在SDS-PAGE中的遷移,監控蛋白的轉膜效率,確定蛋白分子量大小。選擇正確的蛋白Marker是westernblot實(shí)驗成功的條件之一。蛋白Marker分為兩種:一種是未預染的Marker,即寬分子量蛋白標準,高分子量蛋白標準及低分子量蛋白標準;另一種是預染的Marker,即單色預染和多色預染。
一、未預染蛋白Marker
未預染的蛋白Marker是簡(jiǎn)單,也是最準確的一種,由于沒(méi)有附帶染料分子或者標記大小正好是蛋白原本的大小,是精確判斷蛋白大小必須的?,F在的Marker多數選用預混合的marker,方便不同大小蛋白的比較。
二、預染蛋白Marker
預染蛋白Marker是一些純化較好的蛋白混合物,通過(guò)與染料共價(jià)偶聯(lián),在電泳過(guò)程中或者轉膜時(shí)可以直接觀(guān)察到。預染Marker的出現方便了我們的實(shí)驗,這種蛋白分子量標準可以幫助我們在電泳時(shí),電泳后,以及轉膜后檢測電泳情況和估計遷移率。值得注意的是預染蛋白Marker與染料共價(jià)偶聯(lián),所以在不同的緩沖條件下電泳時(shí)遷移特性可能會(huì )發(fā)生某些變化,可能導致一些偏差,所以不太適合精確定位蛋白。