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RIPA裂解液(中)是一種經(jīng)典的動(dòng)物組織/細胞快速裂解液,通過(guò)組合離子型去垢劑和非離子去污劑對組織細胞的消化作用使組織細胞崩解釋放出蛋白質(zhì),對細胞膜、胞漿亞組分、胞核成分均有較強裂解作用。
蛋白酶抑制劑混合物(100×,不含EDTA),細胞粗提取物含有許多內源性酶,例如磷*酶和蛋*酶,能夠降解和改變提取物中的蛋白。提高完整蛋白產(chǎn)量的最佳方法是加入這些酶的抑制劑。
PMSF 溶液(100mM)對絲*酸蛋白酶(如胰*白酶,胰*乳*白酶,凝*酶)和巰基*白酶(如木瓜*白酶)均有強烈的抑制作用,是常用的蛋白酶抑制劑,有效濃度為0.1~1mM。PMSF半衰期約為 30 min,樣品處理超過(guò)1h,可以補加一次。
磷酸酶抑制劑II cocktail(50×)為四種磷酸酶抑制劑的混合物,可抑制絲x酸/蘇x酸蛋白酶,蛋白酪x酸磷酸酶,同時(shí)可抑制酸/堿性磷酸酶等四種磷酸酶。適用于Western blot 和免疫共沉淀檢驗磷酸化蛋白,蛋白激酶活性測定等。
紅細胞裂解液利用細胞內外滲透壓差可導致細胞膜脹破的原理來(lái)裂解紅細胞,主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細胞的分離純化,淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗中紅細胞的去除。
RIPA裂解液(強),通過(guò)組合離子型去垢劑和非離子去污劑對組織細胞的消化作用使組織細胞崩解釋放出蛋白質(zhì),是一種經(jīng)典的動(dòng)物組織/細胞快速裂解液。
NP40裂解液(帶抑制劑)對胞漿亞組分、胞核成分均有較強裂解作用,有利于胞漿蛋白、核蛋白、胞漿磷酸化蛋白及細胞核轉錄因子的提取。
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